Постановка стимулированного НСТ-теста
Гепаринизированную кровь предварительно инкубируют 25 мин при 37° С со стимулятором в равных объемах. Затем проводят вышеописанный НСТ-тест.
Метод «кожное окно» — локального воспаления используют для оценки течения воспалительной реакции, а также хемотаксической активности нейтрофилов и моноцитов in vitro.
В первые часы повреждения кожи на раневой поверхности появляются главным образом нейтрофилы, после 10-12 ч преобладают моноциты, после 28-32 ч — фибробласты; наблюдается появление волокнистых структур.
Изменение течения воспалительной реакции состоит прежде всего в уменьшении выхода клеточных элементов в одних случаях вследствие снижения хемотаксической активности, в других — вследствие перераспределительных механизмов, когда очаг воспаления в самом организме является доминирующим и оказывает более сильное хемотрактантное действие, чем кожная ранка.
Имеют значение и такие признаки, как пикноз ядер нейтрофилов в 1-й фазе реакции, указывающий на высокую повреждаемость этих клеток, резкая вакуолизация цитоплазмы моноцитов в той же фазе, наличие волокнистых структур и фиб- робластов в 1-2-й фазах.
Проведение повторных тестов позволяет судить о динамике воспалительного процесса, ответа на терапию.
Методика исследования. Необходимые материалы: предметные стекла 2 * 2 см с отшлифованными краями, лейкопластырь, скарификатор, этиловый и метиловый спирт, 0,1% водный раствор азура-И и эозина.
На коже передней поверхности предплечья, предварительно обработанной этиловым спиртом, снимают скарификатором слой эпидермиса 0,5 х 1 см. Ранку покрывают стерильным стеклом, которое укрепляют лейкопластырем. Через 6 ч это стекло заменяют другим. Последнее снимают через 24 ч от начала постановки теста. Ранку обрабатывают спиртом. Полученные препараты высушивают на воздухе, фиксируют в течение 5-10 мин метиловым спиртом и окрашивают по Романовскому-Гимзе. Под микроскопом с иммерсией подсчитывают не менее 2000 клеток, определяют процентное соотношение клеточных элементов, описывают морфологические особенности клеток, учитывая наличие или отсутствие волокнистых структур.
Оценка результатов: в норме в препаратах, полученных через 6 ч, нейтрофилы составляют 83,5 ± 6,05%, макрофаги — 15,0 ± 4,8%, эози- нофилы — 1,5 ± 0,4%, лимфоциты, базофилы и волокнистые структуры не определяются — это первая, нейтрофильная, фаза воспалительной реакции. В препаратах, полученных через 24 ч, нейтрофилы составляют 15,8 ± 4,5%, макрофаги — 84,2 ± 8,3%, эозинофилы — менее 0,5%, лимфоциты — единичны, базофилы не определяются. У некоторых детей встречаются фибробласты и волокнистые структуры в виде единичных элементов. Это вторая, макрофагальная, фаза воспалительной реакции.
Leave a Response